近日，我所生物技术部赵宗保研究员团队和薛松研究员团队合作，在非天然辅酶研究方面取得新进展，获得了系列偏好非天然辅酶的亚磷酸脱氢酶突变体，解析了它们与非天然辅酶复合物的结构，揭示了辅酶偏好性改变的分子机制。相关研究成果发表在ACS Catalysis上。

　　天然辅酶，例如吡啶核苷酸辅酶NAD（P）不仅是氧化还原酶广泛使用的辅酶，还承担其它重要生物学功能。因此，天然辅酶扰动可以产生全局性的但同时也难以预测的生物学效应。为实现选择性调控辅酶关联的代谢反应，赵宗保研究团队提出了基于非天然辅酶的研究策略。前期工作中，该团队设计合成了系列非天然辅酶，如烟酰胺胞嘧啶二核苷酸（NCD），采用定向进化策略，筛选得到了多种偏好非天然辅酶的氧化还原酶突变体，并创建了正交的氧化还原催化体系（J. Am. Chem. Soc., 2011）。科研人员设计基于NCD和亚磷酸脱氢酶突变体的能量供给模块，成功用于对胞内代谢途径的选择性驱动，突破了内源代谢网络的热力学瓶颈（ACS Catal., 2017）。

　　该研究中科研人员成功改造并获得NCD偏好性显著改善的亚磷酸脱氢酶突变体，突变酶几乎不利用天然辅酶NAD，但底物亲和力得以保持；获得了亚磷酸脱氢酶野生型和两种突变体的晶体结构，以及其酶-NCD复合体结构。研究发现突变引入的氨基酸残基，一方面造成辅酶结合空腔收缩，限制了NAD进入，另一方面为NCD结合提供了新的分子间相互作用，从而导致突变体显著偏好NCD。该研究成果将为理性改造其它氧化还原酶提供重要科学参考，并促进开展基于非天然辅酶的合成生物学和化学生物学研究。

　　以上研究得到了国家自然科学基金、大连化物所-青岛能源所融合基金等项目的资助。同时，这也是献礼我所七十周年所庆文章之一。（文/图 刘玉雪 冯延宾）